高速逆流色譜儀在裝柱時(shí)的選擇方法介紹
點(diǎn)擊次數(shù)：631 更新時(shí)間：2022-08-01
色譜儀是近30年發(fā)展起來(lái)的一種具有高靈敏度、高選擇性的高效快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測(cè)定，又能用于大量的制備分離，靈活多樣，其應(yīng)用范圍已超過(guò)其他各種分離方法。
高速逆流色譜儀是一款高效、功能強(qiáng)大的模塊化制備色譜系統(tǒng)，其改進(jìn)了中草藥活性成分、化學(xué)合成和生化藥物分離中的純化過(guò)程，允許使用多達(dá)4種不同的溶劑的梯度洗脫，實(shí)現(xiàn)在線檢測(cè)，廣泛使用于中草藥天然產(chǎn)物、有機(jī)合成產(chǎn)物和蛋白質(zhì)生物高分子等目標(biāo)活性成分的分離純化和制備，從實(shí)驗(yàn)室研究到工業(yè)化生產(chǎn)，均可滿足其要求。
那么高速逆流色譜儀在裝柱時(shí)應(yīng)如何選擇呢？
根據(jù)固定相顆粒度和柱子的尺寸，采用不同的裝柱方法，往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度關(guān)系很大，顆粒度的減少會(huì)導(dǎo)致裝柱的難度。一般來(lái)說(shuō)，顆粒直徑小于20-30um的固定相采用濕法裝填。所謂“敲擊－裝填”技術(shù)適用于顆粒直徑大于25um的固定相。濕法的目的是迫使相對(duì)稀松的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子，從而減少空隙的形成。然而，當(dāng)柱直徑大于20mm，所加壓力為30-40bar時(shí)，高壓懸漿裝填技術(shù)就變得十分復(fù)雜。
為將小顆粒固定相裝入更大的制備型色譜柱，可采用柱長(zhǎng)壓縮技術(shù)。這種方法，先將固定相懸漿（或偶爾是干填充物）裝入柱中加壓，利用物理方法將其壓緊。壓緊的方法有兩種：徑向壓縮和軸向壓縮。濕法裝柱需要一定的設(shè)備，在柱子填完后，應(yīng)用有柱效的測(cè)量，對(duì)柱效低的柱子應(yīng)該重填。
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